Mikrobiologiese metodes vir studie van water, grond en lug

Mikro-organismes - klein, meestal eensellige wesens, wat wydverspreid in die natuur is. Hulle kom in alle media (lug, grond, water) in mense en diere, in plante.

Kwalitatiewe diversiteit en aantal organismes afhang hoofsaaklik op voedingswaarde verbindings. Maar dit is ook belangrik as humiditeit, temperatuur, deurlugting en optrede van sonlig en ander faktore.

природных сред позволяют выявить наличие патогенных микроорганизмов, определить их количество и, в соответствии с полученными результатами, выработать меры по устранению или предупреждению инфекционных заболеваний. Metodes vir sanitêre en mikrobiologiese studies natuurlike media kan die teenwoordigheid van patogene op te spoor en om hul bedrag in ooreenstemming met die resultate wat verkry is bepaal, om maatreëls te verwyder of te voorkom aansteeklike siektes te ontwikkel. Daarbenewens is kwantitatiewe rekening nodig vir ekosisteem modellering en die ontwikkeling van die natuurlike prosesse van bestuur. . Laat ons verder kyk wat is die metodes van mikrobiologiese ondersoek.

grond

Dit word deur geleerdes as een van die moontlike roetes van oordrag van aansteeklike siektes. Met afskeidings mens of dier pasiënt in die grond binnedring patogene. Sommige van hulle, in die besonder, spore, kan voortduur in die grond vir 'n lang tyd (soms vir dekades). позволяют определить "микробное число" (кол-во микроорганизмов в грамме грунта), а также коли-индекс (количество кишечных палочек). Die grond val patogene soos gevaarlike infeksies soos tetanus, miltsiekte, lamsiekte, en dies meer. Metodes van sanitêre-mikrobiologiese studie van die grond toelaat om "mikrobiese telling" (die aantal mikro-organismes in die grond van 'n gram), en coli-indeks (die aantal E. coli) definieer .

Grondontleding: 'n oorsig

следует в первую очередь отнести прямое микроскопирование и посев на плотную питательную среду. Metodes vir mikrobiologiese ondersoek van die grond moet in die eerste plek toegeskryf direkte mikroskopie en kultuur op vaste voedingstof medium. Bevolkings van mikro-organismes en hul groepe wat die grond bewoon, verskil oor die taksonomiese status en ekologiese funksies. In die wetenskap, is hulle verenig onder die generiese term "grond biota." Primer - habitat groot aantal mikro-organismes. In gram van grond teenwoordig is 1-10 miljard hul selle. In hierdie omgewing, neem aktief ontbinding van organiese materiaal, met die deelname van verskeie saprofitiese mikro-organismes.

Mikroskopiese studie van mikrobiologiese metode: die stappe

Ontleding van die medium begin met monsterneming. Vir hierdie doel, voorheen geskil en gerasper alkohol mes (graaf kan gebruik word). Daarna het die monster voorbereiding. Die volgende stap - tel selle lood smere. Oorweeg elke stap afsonderlik.

steekproefneming

In die ontleding van landbou grond is geneig monster geneem uit 'n diepte van die hele laag. Eerste verwyder 2-3 cm bo die grond, as dit teenwoordig is in 'n vreemde mikroflora kan wees. Daarna, met 'n oppervlakte van grond bestudeer neem monoliete. Die lengte van elke van hulle moet voldoen aan die dikte van die laag waaruit jy wil proe.

Op 'n plot van 100-200 vierkante. 7-10 m gekies monsters. Die gewig van elk - van die orde van 0.5 kg. Die monsters moet deeglik in die sak gemeng. neem dan die gemiddelde monster weeg ongeveer 1 kg. Dit moet in perkament (steriele) pakket ingesluit in 'n lap sak geplaas word. Voor direkte analise van die in die yskas gebêre monster.

opname Voorbereiding

Die geroer grond uitgegooi op droë glas. Sy pre-vee met alkohol en brand bo die branders. Met 'n spatel grond deeglik gemeng en eweredig uitgebrei. Dit is verpligtend om die wortels en ander vreemde elemente te verwyder. Om dit te doen, gebruik tweezers. Voor operasie tweezers en spatel bo die branders aan die brand gesteek en toegelaat om af te koel.

Van die verskillende grond erwe versprei op die glas, gekies klein porsies. Hulle weeg op 'n porselein bakkie op 'n tegniese skaal. является специальная обработка образца. Verpligte stap mikroskopiese metode van mikrobiologiese studies is die spesiale verwerking van die monster. 2 moet bereid wees om by voorbaat, steriele sak. Hul grootte moet nie meer as 250 ml. Een van die flesse is in 100 ml van kraanwater gegooi. Want dit neem 0,4-0,8 ml vloeistof monster van grond en klam tot 'n pasta. Die mengsel moet gevryf met 'n vinger of rubber stamper vir 5 minute.

Water uit die eerste kolf oorgeplaas na grondmassa leë fles. Verdere, vryf haar rug. Na hierdie massa is oorgeplaas na 'n fles naby die brander vlam. Houer met grond skorsing is geskud op 'n shaker vir 5 min. Daarna is dit toegelaat om te skik vir ongeveer 30 sekondes. Dit is nodig ten einde toe te laat om groot deeltjies op te los. Na 'n halwe minuut massa gebruik word vir die voorbereiding van die voorbereiding.

Seltellings op vaste smere

, разработанному Виноградским. Direkte mikroskopiese studie van die grond word deur die metode van mikrobiologiese studies, ontwikkel Vinogradskii gedra. In sekere volume van die skorsing is getel die aantal selle van mikro-organismes. Die bestudering van vaste smere kan dwelms te stoor in die lang termyn en berekeninge te eniger tyd.

Voorbereiding van die dwelm soos volg. 'N Sekere hoeveelheid mis (tipies 0,02-0,05 ml) toegepas word met 'n micropipette op die skyfie. Om hierdie oplossing 'n druppel van agar-agar is bygevoeg (polisakkaried agaropectin mengsel en agarose uit bruin en rooi alge Swartsee), vinnig geroer en versprei oor 'n gebied 4-6 vk. cm. Pap lug-gedroogde en vir 20-30 minute vasgestel. alkohol (96%). Volgende, die dwelm aangeklam met gedistilleerde water en geplaas in die p-p karbol erytrosine 20-30 min.

Na kleuring, is dit gewas en in die lug droog. Seltellings uitgevoer vanaf die onderdompeling lens.

Saai op soliede media

позволяют выявить большое количество микроорганизмов. Mikroskopiese metodes vir mikrobiologiese ondersoek kan 'n groot aantal van mikro-organismes op te spoor. Maar ten spyte van hierdie, die metode van inenting is die mees algemene in die praktyk. Die essensie bestaan in loting bedrag van die dwelm (grond skorsing) in 'n petribakkie op 'n soliede medium.

позволяет учитывать не только количество, но и групповой, а в ряде случаев и видовой состав микроскопической флоры. Hierdie metode van mikrobiologiese navorsing in ag neem nie net die hoeveelheid nie, maar ook die groep, en in sommige gevalle, en die spesiesamestelling van die mikroskopiese flora. Tel die aantal kolonies geproduseer, gewoonlik uit die onderkant van die petribakkie in oordraagbare lig. Op die berekende area geplaas om 'n merker of ink dot.

water Ontleding

Die mikroflora van die water liggaam, as 'n reël, weerspieël die mikrobiese samestelling van die grond rondom dit. имеют особое практическое значение при изучении состояния конкретной экосистемы. In hierdie konteks, metodes van sanitêre-mikrobiologiese ontleding van water en grond van besondere praktiese belang in die studie van die toestand van 'n bepaalde ekosisteem. Die vars water bevat, as 'n reël, kokke, staafvormige bakterieë.

Anaerobe in water gevind in klein hoeveelhede. As 'n reël, het hulle vermeerder aan die onderkant van liggame van water, in die modder, deel te neem in die proses van suiwering. Mikroflora oseane en seë voordelig verteenwoordig halophytic (halofiliese) bakterieë.

In die water, artesiese boorgate is feitlik geen mikro-organismes. Dit is te danke aan die filter kapasiteit van die grondlaag.

считаются определение микробного числа и коли-титра либо коли-индекса. Konvensionele metodes van mikrobiologiese waternavorsing beskou as die definisie van mikrobiese en coli-titer of if-indeks. Die eerste aanduiding definieer die aantal bakterieë in 1 ml vloeistof. Coli-indeks verteenwoordig die aantal coliforms teenwoordig in 'n liter water, en as titer - die minimum aantal of maksimum verwatering vloeistof waarin hulle nog kan opgespoor word.

Bepaling van mikrobiese nommer

Hierdie metode sanitêre mikrobiologiese ondersoek van water is soos volg. In 1 ml van die water word bepaal aantal mesofiele en fakultatiewe anaërobe (intermediêre) aerobes in staat op vleis-pepton agar (primêre medium) by 37 grade. gedurende die dag om kolonies sigbaar by 'n vergroting van 2-5 p vorm. of die blote oog.

является посев. Die belangrike stap van die metode van mikrobiologiese ontleding van water word gesaai. Want elke monster word gesaai ten minste 2 verskillende volumes. Wanneer kraanwater ontleding in elke koppie gemaak van 1-0,1 ml van suiwer vloeistof en besmet 0,01-0,001 ml. Vir inenting van 0,1 ml of kleiner volume van vloeistof verdun met gedistilleerde (steriele) water. Konsekwent te berei desimale verdunnings. 1 ml van elk van hulle is gemaak in twee petribakkies.

Teling gevul met voedings-agar. Dit moet eers smelt, en koel tot 45 grade. Na roer, is die aktiewe medium links op 'n horisontale oppervlak vir stolling. Op 37 grade. gewasse gekweek word gedurende die dag. позволяет учитывать результаты на тех чашках, где количество колоний находится в пределах от 30 до 300. Die beskou metode van mikrobiologiese waternavorsing in ag neem die resultate van dié geregte waar die aantal kolonies in die reeks 30-300.

lug

Dit word beskou as 'n transito grond vir mikro-organismes. являются седиментация (оседание) и аспирация. Die belangrikste metodes van mikrobiologiese studies is lug sedimentasie (vestiging) en strewe.

Mikroflora lug omgewing is arbitrêr verdeel in veranderlike en konstante. Die eerste groep sluit gis, chromogenic kokke, spoordraende basil coli en ander mikro-organismes wat weerstand teen droog, blootstelling aan lig is. Verteenwoordigers veranderlike mikroflora, indringende in die lug uit hul gewone habitat, lank behou hul vitaliteit.

In die lug van groot stede micro-organismes veel meer as in die lug omgewing van landelike gebiede. Oor die see, woude is baie min bakterieë. Air suiwering te fasiliteer neerslag: sneeu en reën. Binnenshuis mikrobes veel meer as in oop ruimtes. Hulle getal verhoog in die winter in die afwesigheid van 'n gereelde ventilasie.

sedimentasie

считается простейшим. Hierdie metode van mikrobiologiese navorsing in mikrobiologie word beskou as die eenvoudigste wees. Dit is gebaseer op die vestiging van die druppels en deeltjies op die agar oppervlak in 'n oop petribakkie onder swaartekrag. sedimentasie metode kan nie akkuraat die aantal bakterieë in die lug te bepaal. Die feit is dat in 'n oop koppie om die fyn fraksie van die stofdeeltjies en druppels van bakteriële baie moeilik vang. Op die oppervlak behou hoofsaaklik groot deeltjies.

Hierdie metode word nie gebruik vir lug analise. Hierdie omgewing wat gekenmerk word deur groot skommelinge in die spoed van lugvloei. Sedimentasie kan egter gebruik word in die afwesigheid van meer gesofistikeerde toestelle of elektriese kragbron.

Die bepaling van die aantal mikrobiese deur Omelyansky metode. In ooreenstemming daarmee, vir 5 minute op 'n oppervlakte van 100 vierkante agar. cm vestig 'n aantal bakterieë teenwoordig in 10 liter lug is.

Bestel 535 "Op die eenwording van mikrobiologiese metodes van ondersoek"

Bakteriologiese ontleding beslaan 'n belangrike plek in die komplekse kliniese en laboratorium aktiwiteite wat gemik is op die diagnose, voorkoming en behandeling van verskeie aansteeklike siektes. Maar die studie van die omgewing, hulle is nie beperk.

Van besondere belang is die bakteriologiese ontleding van biologiese materiaal in hospitale. Vir navorsing wat in gesondheidsfasiliteite, verhoogde vereistes. Die doel van die Orde "Op die eenwording van mikrobiologiese metodes van ondersoek" is om die bakteriologiese ontleding te verbeter, die verbetering van die gehalte en doeltreffendheid van mikrobiologiese diagnose.

Mikroskopiese ondersoek van smere in vroue

Dit is 'n belangrike metode van analise vir die diagnose van infeksies, seksueel oordraagbare infeksies, en opportunistiese infeksies (opportunistiese bakterieë).

Mikroskopiese analise om die kwalitatiewe en kwantitatiewe samestelling van mikroflora evalueer, let op die korrektheid van steekproefneming. Byvoorbeeld, die teenwoordigheid van die vaginale epiteel in deppers geneem van die servikale kanaal dui op 'n skending van die reëls van keuse van 'n biologiese monster.

Daar word gesê dat mikrobiologiese ondersoek in hierdie saak in die algemeen gevolg word deur 'n paar probleme. Hulle is verwant aan die feit dat in die laer genitale traktus is gewoonlik 'n diverse mikroflora wat wissel by verskillende ouderdomme te bied. Om die doeltreffendheid van navorsing te verbeter en het gestandaardiseerde reëls ontwikkel.

Diagnose van virale infeksies

Dit word uitgevoer deur metodes opsporing RNA en DNA patogene gedra. Hulle is hoofsaaklik gebaseer op die bepaling van nukleotiedvolgordes in patologiese materiaal. Vir hierdie doel, die molekulêre probes. Hulle is kunsmatig geproduseer nukleïensure aanvullend tot (aanvullend tot) die virale sure gemerk met 'n radioaktiewe etiket of biotien.

Die vreemd van die metode herhaal die kopiëring van die spesifieke DNA-fragment bevat 'n paar honderde (of tien) nukleotiedpare. replikasie (kopiëring) is dat uitbreiding kan begin net in sekere eenhede. primers (primers) gebruik om hulle te skep. Hulle is gesintetiseer oligonukleotiede.

PCR diagnose (polimerase kettingreaksie) is eenvoudig in die uitvoering. Hierdie metode laat jou toe om die resultaat vinnig deur die gebruik van 'n klein hoeveelheid van patologiese materiaal. Die gebruik van PCR diagnostiek identifiseer akute, chroniese en latente (verborge) infeksies.

Wanneer die sensitiwiteit van hierdie metode word beskou as meer verkieslik. Maar die huidige toets stelsels is nie betroubaar genoeg, so die PCR diagnose tradisionele metodes nie heeltemal kan vervang.