Serologiese toetse: tipes, gebruik

Laboratorium diagnose van feitlik alle aansteeklike siektes is gebaseer op die opsporing van bloed in teenliggaampies die pasiënt se, wat geproduseer word deur die patogeen antigeen, serologiese metodes. Hulle het in die mediese praktyk in die laat negentiende - vroeë twintigste eeu.

Die ontwikkeling van die wetenskap het gehelp om die antigeniese struktuur van mikrobes en chemiese formules van hul gifstowwe te definieer. Dit is moontlik om nie net terapeutiese maar ook diagnostiese serum skep. Hulle word verkry deur die administrasie van verswakte patogene laboratorium diere. Na 'n paar dae van die week bloed hase of muise voorberei produkte wat gebruik word vir die identifisering van bakterieë of hul gifstowwe gebruik van serologiese toetse.

Die uiterlike manifestasie van hierdie reaksie hang af van die omstandighede van die formulering en die toestand van antigene in die pasiënt se bloed. As mikrobes onoplosbaar deeltjies, hulle skik, lysed, geïmmobiliseer of gebind in serum. As die antigene is oplosbaar, dit blyk dat die verskynsel van neutralisasie of neerslag.

agglutinasie (PA)

Serologiese agglutinasie toets is hoogs spesifiek. Dit is maklik om uit te voer en is baie duidelik om vinnig die teenwoordigheid van antigene op te spoor in pasiënt serum. Dit word gebruik vir die opstel van Vidal reaksie (diagnose van ingewandskoors en paratifus) en Weigl (tifus).

Dit is gebaseer op 'n spesifieke interaksie tussen menslike teenliggaampies (of agglutinins) en mikrobiese selle (agglyutenogenami). Ná hul interaksie gevorm deeltjies wat neerslag. Dit is 'n positiewe teken. Vir die oprigting reaksie gebruik kan word lewend of dood mikrobiese agente, swamme, protosoë, bloedselle en somatiese selle.

Chemiese reaksie is verdeel in twee fases:

1. Spesifieke teenliggaampies saamgestelde (OP) met antigene (Ag).
2. Nie-spesifieke - die afsetting van konglomerate AG-AT, dit wil sê die vorming van die lijmen.

Reaksie indirekte agglutinasie (TPHA)

Hierdie reaksie is meer sensitief as die vorige een. Dit word gebruik vir die diagnose van siektes wat veroorsaak word deur bakterieë, intrasellulêre parasiete, protosoë. Dit is so spesifiek dat selfs 'n baie lae konsentrasies van teenliggaampies kan opspoor.

Vir sy formulering gebruik van gesuiwerde skape se rooibloedselle en rooibloedselle van menslike behandel met teenliggaampies of antigene (dit hang af van wat laboratorium wil om uit te vind). In sommige gevalle, menslike rooibloedselle behandel met immunoglobuliene. Serologic reaksie van eritrosiete word beskou as geldig indien neerslag daarvan plaasgevind het aan die onderkant van die buis. Die positiewe reaksie wat ons kan sê wanneer die selle gerangskik in die vorm van 'n omgekeerde sambreel, beset die hele bodem. Die negatiewe reaksie is behaal toe die rooibloedselle vestig in die vorm van 'n kolom of knoppies in die middel van die onderkant.

neerslag reaksie (RP)

Serologiese reaksies van hierdie tipe dien om uiters klein deeltjies antigene te identifiseer. Dit mag wees, byvoorbeeld, proteïene (of gedeeltes daarvan), verbindings van proteïene met lipiede of koolhidrate, deel van die bakterieë en hul gifstowwe.

Sera vir die reaksie word verkry deur kunsmatige besmetting van diere, tipies hase. In hierdie metode, kan jy absoluut kry enige presipiterende serum. Stellasies serologiese neerslag soortgelyke meganisme van aksie op agglutinasie. Die teenliggaampies in die serum bind aan antigene in die kolloïdale oplossing om groot proteïenmolekules, wat op die bodem van die buis of op die substraat (gel) is gedeponeer vorm. Hierdie metode word beskou as hoogs spesifiek te wees en kan selfs bedrae van die stof op te spoor spoor.

Gebruik om plaag, tularemia, diagnoseer antraks, meningitis en ander siektes. Ook betrokke by die forensiese ondersoek.

Gel neerslag toets

Serologiese toetse kan uit nie net in 'n vloeistof medium, maar in die agarose gel word. Dit is diffuse neerslag metode genoem. Met dit, bestudeer die samestelling van komplekse antigeniese mengsels. Hierdie metode is gebaseer op die chemotakse van antigene aan teenliggaampies, en omgekeerd. Die gel hulle beweeg na mekaar teen verskillende snelhede en vergadering aan neerslag lyne vorm. Elke lyn - 'n stel van K-OP.

Neutralisasie eksotoksien teengif (RN)

Antitoksiese serum kan eksotoksien wat mikro-organismes produseer neutraliseer. Op grond van hierdie data en serologiese toetse. Mikrobiologie gebruik hierdie metode vir die titrasie van sera, gifstowwe en toksoïede, sowel as hul terapeutiese aktiwiteit. Die krag van die neutralisasie van die gifstof word bepaal deur die konvensionele eenhede - AE.

Verder, as gevolg van hierdie reaksie kan die spesie of spesies wat eksotoksien bepaal. Dit word gebruik in die diagnose van tetanus, witseerkeel, lamsiekte. Die studie uitgevoer kan word "op die glas", en in 'n gel.

lise reaksie (RL)

Die immuunstelsel serum, wat die liggaam binnekom van die pasiënt, het, afgesien van sy hooffunksie van passiewe immuniteit, selfs en litiese eienskappe. Dit is in staat om van die ontbinding van mikrobiese agente, sellulêre en vreemde elemente virus wat die liggaam van die pasiënt. Afhangende van die spesifieke aard van die teenliggaampies in die geïsoleerde serum bactericidin, cytolysins, spirohetoliziny, hemolysins en ander.

Hierdie spesifieke teenliggame "komplement" genoem. Dit is gevind in byna al die liggaamsvloeistowwe, dit het 'n komplekse proteïen struktuur en is baie sensitief vir temperatuur verhoog, geskud, sure en direkte sonlig. Maar in die droë toestand in staat is om hul litiese eiendomme in stand te hou van tot ses maande.

Daar is 'n paar vorme van serologiese toetse van hierdie tipe:

- bacteriolysis;

- hemolysis.

Bacteriolysis is uitgevoer met behulp van bloed serum die pasiënt se en spesifieke immuun serum met live kieme. As, dan is die navorser sien die lise van die bakterieë, en die reaksie sal oorweeg word as 'n voldoende aantal positiewe aanvulling teenwoordig in bloed is.

Die tweede bloed serologiese reaksie is dat die skorsing van eritrosiete behandel pasiënt serum bevat hemolysins, wat geaktiveer word slegs in die teenwoordigheid van 'n bepaalde kompliment. As daar een, dan die laboratorium kyk na die ontbinding van rooibloedselle. Hierdie reaksie is wyd gebruik word in die moderne geneeskunde aan die titer van aanvulling bepaal (dit wil sê, sy kleinste bedrag uitdagende lise van rooibloedselle) in die bloed serum en vir die produksie van aanvulling bindend toets. Dit was op hierdie wyse gedoen serologiese reaksie vir sifilis - Wasserman.

complement binding (RSK)

Hierdie reaksie word gebruik om serum teenliggaampies om die pasiënt van 'n aansteeklike agent sowel as die skepper van sy antigeniese struktuur te identifiseer.

Tot op hierdie punt het ons beskryf 'n eenvoudige serologiese toetse. RAC beskou moeilik reaksie, aangesien dit nie twee nie, maar drie elemente interaksie: 'n teenliggaam, 'n antigeen en aan te vul. Die essensie lê in die feit dat die interaksie tussen die teenliggaam en antigeen kom slegs in die teenwoordigheid van proteïene komplimenteer wat geadsorbeer op die oppervlak van die vorm komplekse K-OP.

Hulself antigene na byvoeging van komplement, onderhewig aan wesenlike veranderinge, wat die gehalte van die reaksie aan te dui. Dit kan lise, hemolysis, immobilisasie, kiemdodende of bakteriostatiese werking wees.

Die reaksie self kom in twee fases:

1. Die vorming van teenliggaampies-antigeen, wat nie visueel waarneembaar navorser.
2. Die verandering van die antigeen onder die optrede van aanvulling. Hierdie fase gewoonlik kan teruggevoer word na die blote oog. As die visuele reaksie is nie sigbaar nie, gebruik dan die bykomende aanwyser stelsel wat dit moontlik maak om veranderinge op te spoor.

aanwyser stelsel

Hierdie reaksie is gebaseer op die binding van aanvulling. Die proefbuise uur nadat die opstel van RSK bygevoeg gesuiwerde skape eritrosiete en serum hemolitiese aanvulling bevat nie. As die buis ongebonde aanvulling het oorgebly nie, sal dit sluit die kompleks N-BY gevorm tussen die skape bloedselle en hemolysin, en hul ontbinding veroorsaak. Dit sou beteken dat die DGC is negatief. As rooibloedselle ongeskonde gebly, dan daarvolgens, die reaksie is positief.

hemagglutination (RHA)

Daar is twee fundamenteel verskillende hemagglutination. Een van hulle - serologiese, word dit gebruik vir die bepaling van bloedgroepe. In hierdie geval eritrosiete interaksie met teenliggaampies.

En die tweede reaksie is nie verband hou met serologiese, aangesien rooibloedselle reageer met hemagglutinin wat deur virusse. Aangesien elke opwekker tree net op spesifieke eritrosiete (hoender, skaap, aap), kan ons aanvaar hierdie reaksie eng spesifieke.

Duidelik positief of negatief reaksie, is dit moontlik vir die ligging van die bloed selle in die onderkant van die buis. As hulle vind lyk 'n omgekeerde sambreel, dan is die gewenste virus teenwoordig is in die pasiënt se bloed. En as al die rooibloedselle gevorm soos 'n muntstuk kolomme, daar is geen onbekende patogene.

Reaksie van hemagglutination inhibisie (HAI)

Hierdie hoogs spesifieke reaksie, wat dit moontlik maak om die vorm, soort virus of die teenwoordigheid van spesifieke teenliggaampies in die serum van die pasiënt se bloed te vestig.

Die essensie lê in die feit dat die teenliggaampies by die buis met die toetsmateriaal, verhoed afsetting van antigene op eritrosiete en sodoende hemagglutination stop. Dit is 'n kwalitatiewe aanduiding van die teenwoordigheid van spesifieke antigene in bloed aan 'n bepaalde gewenste virus.

Reaksie immunofluoressensie (RIF)

Die reaksie is gebaseer op die vermoë om komplekse met AT-AH fluorescent mikroskopie identifiseer nadat behandeling flyuorohromnymi kleurstowwe. Hierdie metode is maklik om te gebruik, beteken isolasie van suiwer kultuur nie vereis en neem min tyd. Dit is onontbeerlik vir die vinnige diagnose van aansteeklike siektes.

In die praktyk word hierdie serologiese toetse in twee kategorieë verdeel: direkte en indirekte.

Direkte RIF geproduseer antigeen wat voorheen fluorescent serum verwerk. En Indirekte is dat die dwelm eerste behandel word met konvensionele diagnosticum bestaande teenliggaampies om die verlangde antigeen en dan weer aangewend fluorescent wei, wat spesifiek vir die proteïene van die kompleks K-OP, en mikrobiese selle word sigbaar deur mikroskopie.