Ploskireva medium (Bacto-agar F): beskrywing. mediese mikrobiologie

Ploskireva medium (hierna nog Bacto agar F) is 'n voedingstof medium vir die verbouing van sekere mikro-organismes, hoofsaaklik Shigella en Salmonella. As 'n bron vir haar gebruik besmet materiaal: urine, gal, ontlasting.

storie

Nikolay Ivanovich Ploskirev - Sowjet-mikrobioloog en Geëerde dokter. Hy is gebore in 1869 en oorlede in 1948, nadat die meeste van sy lewe gewerk het in sy tuisdorp - Tomsk.

In 1888, het hy die toekoms wetenskaplike, sonder om die sesde graad van die skool, by die weermag aangesluit. Hy kan die opleiding voltooi slegs in 1892 was, dan verby die eksamen vir toelating tot die Imperial Tomsk Universiteit, studeer hy aan die Fakulteit Geneeskunde. In 1898 ontvang hy die titel van dokter.

Ploskirev deelgeneem in Russies-Japannese Oorlog, en nadat dit gewerk in die Tomsk hospitaal. In 1910 is hy aangestel as die pos van hoof van die dermatologiese en veneriese hospitaal Tomsk, en vir dertig jaar het sy permanente hoof was. Dieselfde wetenskaplike was een van die stigters van STI kliniek in Tomsk.

Nikolay Ivanovich Ploskirev het 'n reeks van werke gewy aan die stryd teen geslagsiektes.

struktuur

Woensdag Ploskireva - materiaal vir die kweek van intestinale bakterieë en daarom moet 'n paar vorme van voedingstowwe bevat. Dit is vervaardig in droë vorm.

Nogal 'n groot deel van sy totale gewig is pankreas hidrolisaat sprot (10,4 g / l). Bietjie minder verantwoordelik vir hydrocitrate dibasiese natrium (8.5 g / l). Ook is daar 'n droë voedingstowwe sous en melksuiker (8,62 en 7,3 g / l).

Die tweede titel Ploskireva medium - J. Bacto-agar in die samestelling is dit teenwoordig in 'n bedrag van agar, 6,94 g / l. Seriovatistokislogo anhidriese natrium-inhoud gelyk aan 5,1 g / l. Daar is die teenwoordigheid van anhidriese dinatriumfosfaat - 2.1 g / l, natriumsoute van cholic suur oor 3,46 g / l en soda-as - 2.4 g

Minder as 'n gram vervat daarin aanwysers - neutraal rooi (0.05) en briljante groen (0,0002). Die jodium inhoud - 0.13.

aansoek

Die studie van die biochemiese prosesse van bakterieë speel 'n baie belangrike rol in die diagnose van siektes wat anaërobiese organismes veroorsaak. Spesies in hierdie familie - honderde. Hulle is byna identies in morfologie en kulturele eienskappe en mees betroubare manier om hulle van mekaar te onderskei - is die studie van biochemie.

Die studie begin met die inenting van patologiese materiaal in die kultuur medium. Sy patologiese ewenaar vir kolivorme bakterieë en 'n deel daarvan, in toevoeging tot plain agar, sluit ligte en laktose. Verwerking vermoë van laktose - 'n belangrike teken van differensiasie van Enterobacteriën. As dit ontdek, die pH verskuif na suur en die aanwyser is geaktiveer, wat die kolonie draai.

Ander lande kan ander voedingstowwe media gebruik, maar hul meganisme van aksie kom ooreen met die drie mees algemene in Rusland - hierdie omgewing Endo en Levine Ploskireva Woensdag.

Beskrywing van die metode

Buiteland Ploskireva analoog medium is 'n sogenaamde Macconkey Agar. In klaar vorm deursigtige oplossing het 'n ligte pienk-geel kleur. Kolonies in staat om laktose te verwerk, onder Ploskireva gee rooi (cranberry) kleur. As die bakterieë nie kan verwerk nie, of kolonie is kleurloos of 'n swak kleur.

Gegee dat die samestelling van die medium sluit stowwe Ploskireva inhibeerders (briljante groen, galsoute, jodium), dit is byna heeltemal inhibeer die groei van gram-positiewe flora, as in die eerste dag eshehiry aansienlik die groei, sowel as ander gewone gepaardgaande mikroflora vertraag.

tweede been

Verder van belang is die keuse van die kolonie, en dit is gekeur op 'n primêre stoor medium en differensiasie. Omgewing waarin daar is loting moet verskeie substrate bevat. Bakteriële kultuur moet ensiematiese aktiwiteit op te spoor ten opsigte van hulle aan dieselfde medium geplaas in die buise so dat daar twee plekke:

• een waarin die skuins agar;
• met 'n kolom.

Die belang van navorsers in die kolonie bevolk afgeskuinste gedeelte digte beroerte en in 'n kolom - 'n prik. Op hierdie stadium, die medium wat gebruik word Russell, Kligler of Olkenitskogo. As differensiële diagnose gebruik en Ploskireva Woensdag.

Mikrobiologie en patogeniese organismes

Agar Ploskireva is 'n belangrike faktor in die opsporing van infeksies wat veroorsaak word deur Enterobacteriaceae. So, byvoorbeeld, is dit gegroei en onderskei kolonies van mikro-organismes wat bacillary disenterie veroorsaak. Dit anaërobiese organismes wat deel uitmaak van die genus Schigella.

Soos almal wat deel is van 'n gesin van intestinale bakterieë, shigella het die vorm van stokke, die grootte van twee mikrometer. Hulle het nie uitmaak kapsules en spore het flagella - dit laat hulle toe om te onderskei van Salmonella, wat op sy beurt, is mobiele. Hulle groei goed op die meeste eenvoudige media, by 'n temperatuur effens bo die omringende (35-37 ° C) en 7,4 pH. Deur die aard van groei, hoef kolonies nie verskil van Salmonella.

Soos hierbo bespreek, kan mikro-organismes wees aansienlik morfologiese verskille egter aansienlik wissel in biochemiese prosesse van die lewe. Dus, behalwe vir Shigella Nyukestl, sonder die vorming van suur gas voorkom tydens fermentasie van koolhidrate. Met die uitsondering van Shigella sonnei, kan hulle nie laktose gis, maar verteer glukose. Net om hul belangrike funksies, kan jy dit doen wat hulle kan om niraty verminder na nitriet. Hul kolonies was verteer met ureum, sowel as in die kultuur medium is geen vervloeiing van gelatien.

Versameling en voorbereiding van saad

Om agente van disenterie op te spoor, word vereis mikrobiologiese toetse besmette omgewings, naamlik ontlasting pasiënt. By ontvangs van die materiaal, moet jy so gou as moontlik na die saai doen. fosfaat buffer mengsel of gliserol - as dit nie moontlik is nie, moet die bron in 'n preserveermiddel geplaas word. By 4 ° C, kan dit gestoor word vir meer as 'n dag. Versamel die materiaal moet uitgevoer word deur middel van 'n rektale glasbuis wat in die rektum ingevoeg word.

Vir studies van 'n materiaal gekies etterige mukus stukke om gewas te word in twee tot drie buise isotoniese natriumchloriedoplossing.

Toepassing van patogeniese bakterieë in die omgewing Ploskireva gemaak glas spatel. Wat jy nodig het om te vryf op 'n klein gedeelte van sy agar, dan skeur die spatel op die omgewing, en die oorblywende materiaal is gevryf in die gesaai oppervlak. As die loting is gedoen in 'n paar koppies, dan aan elkeen van hulle nodig het om 'n nuwe batch plant.

As muco-etterige stukke daar in die neem van 'n toegewyde analise, beteken dit nie dat daar geen teenwoordigheid van patogene. In so 'n geval is dit nodig om ontlasting emulsifiseer in 10 ml van natriumchloried (konsentrasie 0,85%) en dan saai een of twee druppels op 'n medium Ploskireva. Nie-emulgeerbare stoel kan gesaai in selenitovy sous. Hy het ook gebruik, as, in plaas van die ontlasting is braaksel of wassery.

mikrobiologiese diagnose

In die eerste fase van mikrobiologiese studies saai van patogeniese bakterieë in twee koppies uitgevoer, dan om te kyk hoe om te groei Shigella. Woensdag geproduseer Ploskireva 'n gewas, en die tweede - op die omgewing of Endo Levin.

As gevolg van die feit dat daar stamme van shigella is bestand teen antibiotika, die medium is aangevul met chlooramfenikol. Dan kom dit binne dae inkubasie in 'n broeikas by 37 ° C.

Op die tweede dag na die volwasse kolonies te verken. Diegene wat nie op die ewenaar diagnostiese medium gegroei kleurlose, is dit nodig om onkruid uit medium of kort Russell se "mengelmoes ry." Verdere navorsing is gedoen deur die algoritme van die primêre gewasse op hulle. Kolonies van Shigella op Woensdag Ploskireva groei in die vorm van deursigtige, kleurloos en klein kolomme. Hulle is van twee soorte:

• plat met getande rande;
• afgeronde, konveks, met 'n tipiese nat glans.

Drie of vier kolonies moet mikroskopirovat en ondersoek vir mobiliteit. As laasgenoemde nie opdaag, verskuif hulle op Woensdag Olkenitskogo om 'n suiwer kultuur te isoleer. In die afwesigheid van kenmerkende kolonies Shigella of indien geen groei glad waargeneem word, is dit nodig om Endo agar of Ploskireva produkte loting van selenitovogo sous. As die tipiese kolonies aanwesig in voldoende getalle is, sit die beraamde agglutinasie. 'N mengsel van sera sonnei en Flexner, reaksie plaasvind op die glas.

verdere navorsing

Op die derde dag is daar veranderinge wat plaasgevind het in die kolonies op die medium Russell se. As daar 'n kultuur wat nie die laktose nie verneder en glukose fermenteer om 'n suur produseer, is dit geskei en ontleed, spandeer mikroskopie, sowel as uit te voer saai in die "mengelmoes ry," maar hierdie keer uitgebrei. Net sit die agglutinasie reaksie, ten einde serologiese identifikasie.

Op die laaste dag, kan dit afgelei word aan die hand van veranderinge in die "mengelmoes aantal" (as daar is fermentasie van koolhidrate), sowel as 'n opsomming van die agglutinasie reaksie.

Stoor en voorbereiding

Voorbereiding van agar Ploskireva kom soos volg:

1. 55 g droë stof geroer in 'n liter gedistilleerde water.
2. Gekook vir twee tot drie minute totdat die agar is nog nie heeltemal gesmelt.
3. Giet in petribakkies (steriliteit opsioneel) laag van 5-6 mm.
4. Die plate is oopgelaat vir 'n halfuur teen kamertemperatuur (18-25 grade). Na hierdie tyd van die medium is voldoende verhard en droog.

Woensdag Ploskireva fotosensitiewe en higroskopiese. Die poeier moet gestoor word in 'n verseëlde pakket, moet die relatiewe humiditeit in die kamer nie meer as 60%. Die optimum temperatuur vir die berging van 2 ° C tot 25 ° C. Stoor moet voldoen aan die reëls, anders moontlik onakkurate bevindings.